有償求微生物方法學(xué)驗證方案和試驗過程

有一個制劑產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)，里面有一項是微生物限度，求高人根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)寫出微生物方法學(xué)驗證方案和具體的試驗過程。具體要求同CTD申報資料的P5模塊。

制劑產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)如下：

微生物限度  取本品10g，加入無菌聚山梨酯80（預(yù)加熱至40℃～45℃）5g，混勻，再加入沖洗液（預(yù)加熱至40℃～45℃）85ml，混勻，作為供試品溶液（1），量取供試品溶液（1）10ml，加中和劑90ml，混勻，靜置20分鐘，作為供試品溶液（2）。

需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)  用沖洗液（預(yù)加熱至40℃～45℃）50ml沖洗濾膜，取供試品溶液（2）10ml（相當(dāng)于供試品0.1g），薄膜過濾，用沖洗液（預(yù)加熱至40℃～45℃）沖洗濾膜3次，每次100ml。分別取以上濾膜，照非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計數(shù)法（現(xiàn)行中國獸藥典附錄1105）檢查。

金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌  用沖洗液（預(yù)加熱至40℃～45℃）50ml沖洗濾膜，取供試品溶液（1）10ml（相當(dāng)于供試品1g），薄膜過濾，用沖洗液（預(yù)加熱至40℃～45℃）沖洗濾膜3次，每次100ml。分別取以上濾膜，照非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：控制菌檢查法（現(xiàn)行中國獸藥典附錄1106）檢查。

每1g供試品中需氧菌總數(shù)不得過10²cfu，霉菌和酵母菌總數(shù)不得過10¹cfu，不得檢出金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌。

附注：

1.沖洗液

2.中和劑

3.磷酸鹽緩沖液（pH8.0）

4.磷酸鹽緩沖液（pH6.0）

5.制霉菌素含量測定所用的試驗菌：釀酒酵母（saccharomyces cerevisiae）ATCC2601

6.制霉菌素含量測定所用的培養(yǎng)基

培養(yǎng)條件   在28℃～32℃培養(yǎng)18～24小時。